ANALÝZA LIDSKÉHO GERMINÁLNÍHO GENOMU METODOU MLPA
Metoda stanovení relativního počtu kopií cílové sekvence DNA lidského germinálního genomu. Využívá až 45 MLPA sond, které obsahují krátkou sekvenci specifickou pro cílovou sekvenci DNA vzorku a vazebná místa pro univerzální forward a reverse PCR (polymerázová řetězová reakce) primery.
+74 bodůoproti 2025
Vývoj v čase
- Nositelé výkonu
- Kategorie úhrady
- Kategorie: P – hrazen plně
- Doba výkonu
- 215 min
- Čas nositele VZP
- 215
- Typ formuláře
- Ambulantní
- Frekvenční omezení
- 5/1 čtvrtletí
- Omezení místem
- S – pouze na specializovaném pracovišti
Poznámka
Jeden z oligonukleotidů nese tzv. stuffer" sekvenci různé délky, která je specifická pro každou próbu. Po 16-20 hodinové hybridizaci k cílové DNA je každý pár navázaných sousedících oligonukleotidů spojen v ligační reakci. Pak proběhne PCR reakce s použitím fluorescenčně značeného páru primerů pro amplifikaci sond. Jen oligonukleotidy, které přesně hybridizovaly k cílové sekvenci těsně vedle sebe, se ligují a následně amplifikují za tvorby PCR produktů unikátní délky. Výsledné PCR produkty se separují kapilární elektroforézou a zaznamenají se hodnoty výšky a plochy jednotlivých píků reprezentujících jednotlivé PCR produkty. Srovnáním výsledků jednotlivých PCR produktů u vyšetřovaného vzorku s výsledky kontrolních reakcí se získávají relativní hodnoty výšek a ploch jednotlivých píků. Ty pak odrážejí relativní počet kopií cílové sekvence pro danou sondu."
Průběh výkonu
Zahájení
Přípravou reakční směsi.
Průběh
Hybridizace sond, ligace, PCR reakce, kontrola kvality PCR produktu, příprava denaturačního media s kontrolním standardem, separace fragmentů na kapilárním sekvenátoru, vyhodnocení výsledku vsekvence na obou vláknech, sepsání zprávy, součástí tohoto výkonu i interpretace nálezu.
Ukončení
Výkon končí vydáním zprávy a archivací výsledku.
Materiály (1)
- 3 541,67 bodů
Přístroje (2)
- 1 630,96 bodů
- 293,57 bodů