IN SITU HYBRIDIZACE LIDSKÉ DNA SE ZNAČENOU SONDOU
Metoda FISH je určena k analýze vrozených a získaných chromozomových a/nebo genových odchylek v mitozách, v nedělících se interfázních jádrech a/nebo na tkáňových řezech za použití DNA sond pro specifické chromozomové struktury (centromery, telomery, satelitní DNA), sond pro jedinečné genové kopie (lokus-specifické sondy) a tzv. malovacích sond pro celé chromozomy nebo jejich části.
+60 bodůoproti 2025
Vývoj v čase
- Nositelé výkonu
- Kategorie úhrady
- Kategorie: P – hrazen plně
- Doba výkonu
- 420 min
- Čas nositele VZP
- 60
- Typ formuláře
- Ambulantní
- Frekvenční omezení
- bez omezení
- Omezení místem
- BOM – bez omezení
Průběh výkonu
Zahájení
Příprava pracovních roztoků. Příprava preparátu z fixované buněčné suspenze, nátěru nesrážlivé krve, kostní dřeně nebo jiné tkáně a/nebo z tkáňového řezu. Kontrola kvality preparátu ve světelném mikroskopu.
Průběh
Příprava a ředění DNA sondy, příprava hybridizační směsi, denaturace. Ošetření preparátu před hybridizací (tzv. pretraetment, dehydratace v alkoholové řadě atd.), denaturace, dehydratace, sušení skla. Aplikace sondy na preparát, překrytí hybridizačního pole a fixace krycího skla, hybridizace 24 – 72 hodin (podle typu DNA sondy) v hybridizační peci nebo v termostatu. Odstranění krycího skla, posthybridizační mytí preparátu v sérii mycích roztoků, dehydratace, sušení skla. Barvení preparátu DAPI, zamontování preparátu. Analýza fluorescenčních signálů ve fluorescenčním mikroskopu vybaveném specifickými optickými filtry odpovídajícími použitým fluorochromům. Charakteristický obraz z fluorescenčního mikroskopu, zahrnující jak normální tak především patologický nález, je snímán CCD kamerou a dále zpracováván pomocí počítačové analýzy obrazu se softwarem pro FISH. Průměrně je hodnoceno 300 interfázních jader, u FISH s imunobarvením je hodnoceno alespoň 100 jader. Pokud to charakter materiálu dovoluje, je hodnoceno nejméně 10 metafází. V případě hodnocení histologického řezu je vyhodnocen počet a uspořádání signálů u 100 hodnotitelných jader. Výsledkem je procentuální zastoupení sledovaných změn nebo normálního nálezu. Patologické nálezy jsou pro dokumentaci archivovány na pevném disku nebo na magnetooptických či DVD discích, případně v tištěné podobě ve složce pacienta. Výsledky vyšetření metodou FISH jsou uváděny ve formě standardizovaného zápisu podle mezinárodně závazné ISCN nomenklatury. Výsledky jsou rovněž ukládány a archivovány v databázi nemocných.
Ukončení
Originál výsledkového listu schválený a podepsaný vedoucím laboratoře nebo pověřeným zástupcem a opatřený razítkem pracoviště je odeslán ošetřujícímu lékaři.
Materiály (1)
- 5 765,65 bodů