DETEKCE IN VITRO STIMULACE T LYMFOCYTŮ SPECIFICKÝMI ANTIGENY
Plná (heparinizovaná) krev je kultivována za přítomnosti specifických antigenů, které v případě přítomnosti T lymfocytů, které již dříve byly v kontaktu s těmito antigeny, jsou stimulovány a produkují interferon gamma. Produkce interferonu je stanovena kvantitativně nebo jsou prokazovány stimulované T lymfocyty.
+4 bodůoproti 2025
Vývoj v čase
- Nositelé výkonu
- Kategorie úhrady
- Kategorie: P – hrazen plně
- Doba výkonu
- 33 min
- Čas nositele VZP
- 5
- Typ formuláře
- Ambulantní
- Frekvenční omezení
- 1/1 den, 4/1 rok
- Omezení místem
- S – pouze na specializovaném pracovišti
Průběh výkonu
Zahájení
Výkon začíná odběrem krve do heparinizované stříkačky (zkumavky), nebo přímo do vakuovaných zkumavek se specifickým antigenem. Je-li odběr proveden do heparinizované stříkačky (zkumavky) provede se rozdělení na alikvoty pro kultivaci se specifickými antigeny, s mitogenem a negativní kontrolou; přidají se antigeny, mitogen, fyziol.roztok. Pokračuje inkubací krve v termostatu 16 až 24 hodin při 37 st. C.
Průběh
Po inkubaci se provede stažení plasmy (event. po jemné centrifugaci). Stažená plasma se může testovat buď bezprostředně nebo se do dalšího vyšetření může uschovat v lednici při 2 až 8 st. C nejdéle 28 dní nebo zmražená při nejméně -20 st. C tři měsíce. Semikvantitativní (kvantitativní) stanovení interferonu se provádí technikou ELISA v dodaných soupravách. Reakce zahrnuje přidání 50 ul konjugátu do každé jamky, následuje přidání 50 ul vyšetřo-vané plasmy nebo standardu. Následuje dobré promíchání směsi na míchadle a inkubace 120 minut při pokojové teplotě. Po inkubaci se provede 6 násobné promytí jamek, přidá se 100 ul substrátu a znovu se inkubuje cca 30 min.při pokojové teplotě. Reakce se zastaví přidáním 50 ul stop roztoku a provede se po 5 minutách čtení na fotometru.
Ukončení
Výkon končí vyhodnocením naměřených absorbancí a porovnáním s cut off hodnotou. V závislosti na zjištěných koncentracích gamma interferonu ve třech jednotlivých jamkách (antigeny, mitogen, negat.kon-trola) pro každý test může být celkový výsledek vyšetření pacienta hodnocen jako pozitivní, negativní, neurčitý.
Materiály (1)
Přístroje (1)
- 19,53 bodů